巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）是一種19.02kDa的造血生長因子，含有162個(gè)氨基酸殘基。該蛋白的活性：形式為同源二聚體，由成骨細(xì)胞分泌。M-CSF可控制單核細(xì)胞、巨噬細(xì)f胞和骨髓祖細(xì)胞的生成、分化和功能。M-CSF能夠通過結(jié)合其受體CSF-1R激活 CSF-1信號(hào)通路。
一、體外細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用
原代巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)：
推薦濃度20ng/ml，與RANKL（30ng/ml）聯(lián)用可誘導(dǎo)破骨細(xì)胞分化
培養(yǎng)體系需含10%胎牛血清的α-MEM培養(yǎng)基，37℃ CO?條件下培養(yǎng)
細(xì)胞系維持：
維持培養(yǎng)時(shí)建議5-10ng/ml，每2-3天換液
貼壁細(xì)胞傳代前需用含EDTA的胰酶消化
二、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用
皮下注射方案：
常用劑量100-200μg/kg，每日1次連續(xù)3天
注射部位建議選擇肩胛骨間區(qū)或腹股溝
腹腔注射方案：
適用于快速動(dòng)員，劑量可調(diào)整至50μg/kg
需確認(rèn)無菌操作，避免腹腔感染
三、質(zhì)量控制要點(diǎn)
活性驗(yàn)證：
建議通過CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性（EC50約5-10ng/ml）
流式檢測(cè)CD11b和F4/80表達(dá)驗(yàn)證分化效率
儲(chǔ)存條件：
凍干粉4℃可保存1個(gè)月，-20℃長期保存
溶解后分裝保存，避免反復(fù)凍融
四、注意事項(xiàng)
無菌操作：
所有操作需在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行
建議使用0.22μm濾膜過濾
劑量調(diào)節(jié)：
首次使用建議進(jìn)行劑量梯度測(cè)試（5-50ng/ml）
高濃度可能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡
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